フキ（Petasites japonicus）のクロロゲン酸酸化酵素の精製と性質
フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿，イオン交換クロマトグラフィー，疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により，本酵素はアセトン分画後の粗酵素液の約115倍に精製され，回収率は11.3％であった。本酵素はPAGEおよびSDS-PAGE上で単一のバンドを示し，電気泳動的に均一であった。精製酵素の分子量はゲル濾過およびSDS-PAGEによりそれぞれ26,000および25,000と推定された。本酵素はクロロゲン酸および（－）-エピカテキンを強く酸化し，クロロゲン酸（pH 4.0，30℃で測定）および（－）-エピカテキン（pH 8.0，30℃で測定）の酸化反応時のミカ...
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| Published in | Food preservation science Vol. 35; no. 4; pp. 179 - 186 |
|---|---|
| Main Authors | , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | English Japanese |
| Published |
一般社団法人 日本食品保蔵科学会
2009
|
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1344-1213 2186-1277 |
| DOI | 10.5891/jafps.35.179 |
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| Abstract | フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿，イオン交換クロマトグラフィー，疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により，本酵素はアセトン分画後の粗酵素液の約115倍に精製され，回収率は11.3％であった。本酵素はPAGEおよびSDS-PAGE上で単一のバンドを示し，電気泳動的に均一であった。精製酵素の分子量はゲル濾過およびSDS-PAGEによりそれぞれ26,000および25,000と推定された。本酵素はクロロゲン酸および（－）-エピカテキンを強く酸化し，クロロゲン酸（pH 4.0，30℃で測定）および（－）-エピカテキン（pH 8.0，30℃で測定）の酸化反応時のミカエリス定数はそれぞれ，0.14 mMおよび0.7 mMであった。本酵素のクロロゲン酸酸化活性（ChO）および（－）-エピカテキン酸化活性（EpO）の最適pHはそれぞれ，4.0および8.0であった。ChO，EpOの両活性ともpH4～9の範囲で，4℃，22時間安定であった。両活性とも最適温度は30℃であり，60℃で10分間の加熱処理に対して安定であった。両活性とも5 mMのL-アスコルビン酸およびL-システインにより強く阻害された。 |
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| AbstractList | フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿，イオン交換クロマトグラフィー，疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により，本酵素はアセトン分画後の粗酵素液の約115倍に精製され，回収率は11.3％であった。本酵素はPAGEおよびSDS-PAGE上で単一のバンドを示し，電気泳動的に均一であった。精製酵素の分子量はゲル濾過およびSDS-PAGEによりそれぞれ26,000および25,000と推定された。本酵素はクロロゲン酸および（－）-エピカテキンを強く酸化し，クロロゲン酸（pH 4.0，30℃で測定）および（－）-エピカテキン（pH 8.0，30℃で測定）の酸化反応時のミカエリス定数はそれぞれ，0.14 mMおよび0.7 mMであった。本酵素のクロロゲン酸酸化活性（ChO）および（－）-エピカテキン酸化活性（EpO）の最適pHはそれぞれ，4.0および8.0であった。ChO，EpOの両活性ともpH4～9の範囲で，4℃，22時間安定であった。両活性とも最適温度は30℃であり，60℃で10分間の加熱処理に対して安定であった。両活性とも5 mMのL-アスコルビン酸およびL-システインにより強く阻害された。 フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により、本酵素はアセトン分画後の粗酵素液の約115倍に精製され、回収率は11.3％であった。本酵素はPAGEおよびSDS-PAGE上で単一のバンドを示し、電気泳動的に均一であった。精製酵素の分子量はゲル濾過およびSDS-PAGEによりそれぞれ26,000および25,000と推定された。本酵素はクロロゲン酸および（－）－エピカテキンを強く酸化し、クロロゲン酸（pH4.0、30℃で測定）および（－）－エピカテキン（pH8.0、30℃で測定）の酸化反応時のミカエリス定数はそれぞれ、0.14mMおよび0.7mMであった。本酵素のクロロゲン酸酸化活性（ChO）および（－）－エピカテキン酸化活性（EpO）の最適pHはそれぞれ、4.0および8.0であった。ChO、EpOの両活性ともpH4〜9の範囲で、4℃、22時間安定であった。両活性とも最適温度は30℃であり、60℃で10分間の加熱処理に対して安定であった。両活性とも5mMのL－アスコルビン酸およびL－システインにより強く阻害された。 |
| Author | 藤田, 修二 趙, 福善 太田, 真由美 小川, 剛史 韓, 雲哲 |
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| Snippet | フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿，イオン交換クロマトグラフィー，疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により，本酵... フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により、本酵素はアセトン... |
| SourceID | affrit jstage |
| SourceType | Open Access Repository Publisher |
| StartPage | 179 |
| SubjectTerms | エピカテキン酸化酵素活性 クロロゲン酸酸化酵素活性 フキ（Petasites japonicus） ポリフェノール酸化酵素 精製と性質 |
| Title | フキ（Petasites japonicus）のクロロゲン酸酸化酵素の精製と性質 |
| URI | https://www.jstage.jst.go.jp/article/jafps/35/4/35_179/_article/-char/ja https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010780484 |
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