フキ（Petasites japonicus）のクロロゲン酸酸化酵素の精製と性質

• Published in: Food preservation science Vol. 35; no. 4; pp. 179 - 186
• Main Authors: 韓, 雲哲, 藤田, 修二, 太田, 真由美, 趙, 福善, 小川, 剛史
• Format: Journal Article
• Language: English; Japanese
• Published: 一般社団法人 日本食品保蔵科学会 2009
• Subjects: エピカテキン酸化酵素活性; クロロゲン酸酸化酵素活性; フキ（Petasites japonicus）; ポリフェノール酸化酵素; 精製と性質
• ISSN: 1344-1213; 2186-1277
• DOI: 10.5891/jafps.35.179

フキのポリフェノール酸化酵素をアセトン沈殿，イオン交換クロマトグラフィー，疎水クロマトグラフィーおよびゲル濾過により精製した。これらの操作により，本酵素はアセトン分画後の粗酵素液の約115倍に精製され，回収率は11.3％であった。本酵素はPAGEおよびSDS-PAGE上で単一のバンドを示し，電気泳動的に均一であった。精製酵素の分子量はゲル濾過およびSDS-PAGEによりそれぞれ26,000および25,000と推定された。本酵素はクロロゲン酸および（－）-エピカテキンを強く酸化し，クロロゲン酸（pH 4.0，30℃で測定）および（－）-エピカテキン（pH 8.0，30℃で測定）の酸化反応時のミカエリス定数はそれぞれ，0.14 mMおよび0.7 mMであった。本酵素のクロロゲン酸酸化活性（ChO）および（－）-エピカテキン酸化活性（EpO）の最適pHはそれぞれ，4.0および8.0であった。ChO，EpOの両活性ともpH4～9の範囲で，4℃，22時間安定であった。両活性とも最適温度は30℃であり，60℃で10分間の加熱処理に対して安定であった。両活性とも5 mMのL-アスコルビン酸およびL-システインにより強く阻害された。