黑布药膏对慢性皮肤溃疡伴有异常纤维化的治疗作用及机制

R285.5; 目的 研究黑布药膏对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人永生化表皮细胞(HaCaT)上皮间质转化(EMT)的影响,探讨黑布药膏治疗慢性皮肤溃疡伴有异常纤维化的作用机制.方法 使用TGF-β1诱导人HaCa细胞EMT模型.将HaCaT细胞分为空白对照组,模型组,以及黑布药膏高、中、低剂量组.各组均加入DMEM高糖培养基(4.00 mmol/L左旋谷酰胺、4.5 g/L葡萄糖)外,模型组加入TGF-β1(0.01 mg/L),黑布药膏高、中、低剂量组加入TGF-β1(0.01 mg/L)与不同剂量黑布药膏提取物(0.5、0.25、0.125 mg/L).使用CCK-8法检测黑...

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Published in北京中医药大学学报 Vol. 46; no. 12; pp. 1684 - 1693
Main Authors 姚文涛, 彭冰, 马慧可, 王正春, 曲剑华, 李萍, 何秀娟
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所 北京 100010 01.12.2023
Subjects
黑布药膏
human immortalized epidermal cells
慢性皮肤溃疡
skin fibrosis
HeiBu Ointment
chronic skin ulcer
上皮间质转化
epithelial-mesenchymal transition
人永生化表皮细胞
皮肤纤维化
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ISSN1006-2157
DOI10.3969/j.issn.1006-2157.2023.12.009

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Summary:R285.5; 目的 研究黑布药膏对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人永生化表皮细胞(HaCaT)上皮间质转化(EMT)的影响,探讨黑布药膏治疗慢性皮肤溃疡伴有异常纤维化的作用机制.方法 使用TGF-β1诱导人HaCa细胞EMT模型.将HaCaT细胞分为空白对照组,模型组,以及黑布药膏高、中、低剂量组.各组均加入DMEM高糖培养基(4.00 mmol/L左旋谷酰胺、4.5 g/L葡萄糖)外,模型组加入TGF-β1(0.01 mg/L),黑布药膏高、中、低剂量组加入TGF-β1(0.01 mg/L)与不同剂量黑布药膏提取物(0.5、0.25、0.125 mg/L).使用CCK-8法检测黑布药膏对HaCaT细胞活性的影响;划痕实验检测黑布药膏对HaCaT细胞迁移能力的影响;免疫荧光法检测EMT上皮标志物上皮钙黏素(E-cadherin),间质标志物神经钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达;蛋白质印迹法检测Sma和Mad相关蛋白(Smad)和胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白的表达.结果 黑布药膏提取物浓度在0.5 mg/L以下对HaCaT细胞活性无影响.与模型组相比,黑布药膏各剂量组可抑制TGF-β1刺激后的HaCaT细胞迁移,促进E-cadherin表达,抑制N-cadherin、vimentin表达,抑制TGF-β1诱导的HaCaT细胞Smad2、Smad3和ERK1/2蛋白的磷酸化(P<0.05).结论 黑布药膏可能通过抑制Smad和ERK信号通路,抑制表皮细胞向间质细胞过度转化,从而促进创面周围异常纤维化的慢性皮肤溃疡愈合.
ISSN:1006-2157
DOI:10.3969/j.issn.1006-2157.2023.12.009