移植Toll样受体3处理脐带间充质干细胞对小鼠狼疮性肾炎的治疗效果及其机制
R593.242; 目的:探讨Toll样受体3(TLR3)激活对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植治疗狼疮性肾炎(LN)的效果,并初步阐明其作用机制.方法:培养hUC-MSCs并鉴定,10 mg·L-1聚肌胞苷酸处理hUC-MSCs.45只MRL/Lpr雌性小鼠随机分为模型组、hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组,另取15只C57BL/6C雌性小鼠作为对照组;小鼠尾静脉注射hUC-MSCs或聚肌胞苷酸处理的hUC-MSCs.给药后,每2周测定1次小鼠24 h尿蛋白水平;8周后采血并取肾组织,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体水平...
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| Published in | 吉林大学学报（医学版） Vol. 48; no. 5; pp. 1256 - 1265 |
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| Main Authors | , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Chinese |
| Published |
海南省人民医院 海南医学院附属海南医院风湿免疫科,海南 海口570311%海南省人民医院 海南医学院附属海南医院康复医学科,海南 海口570311
01.09.2022
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| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1671-587X |
| DOI | 10.13481/j.1671-587X.20220520 |
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| Abstract | R593.242; 目的:探讨Toll样受体3(TLR3)激活对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植治疗狼疮性肾炎(LN)的效果,并初步阐明其作用机制.方法:培养hUC-MSCs并鉴定,10 mg·L-1聚肌胞苷酸处理hUC-MSCs.45只MRL/Lpr雌性小鼠随机分为模型组、hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组,另取15只C57BL/6C雌性小鼠作为对照组;小鼠尾静脉注射hUC-MSCs或聚肌胞苷酸处理的hUC-MSCs.给药后,每2周测定1次小鼠24 h尿蛋白水平;8周后采血并取肾组织,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体水平和肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素17(IL-17)水平.HE染色和PAS染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,免疫荧光染色检测各组小鼠肾组织中IgG和补体C3沉积.Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和自噬相关蛋白表达水平.结果:hUC-MSCs具有典型的间充质干细胞特征.与对照组比较,模型组小鼠血清中抗dsDNA抗体水平明显升高(P<0.05),肾组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显升高(P<0.05),肾组织中出现肾小球系膜细胞增生、肾小管萎缩坏死和炎症细胞浸润现象,肾组织中IgG和C3沉积明显(P<0.05),肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和酵母ATG6的同系物(Beclin1)蛋白表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,给药4周时TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平降低(P<0.05),6和8周时hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平均明显降低(P<0.05),血清中抗dsDNA抗体水平降低(P<0.05),肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显降低(P<0.05),肾组织病变有一定程度的改善,肾组织中IgG和C3沉积减少(P<0.05),且TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织改善更为明显;hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显降低(P<0.05),LC3 |
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| AbstractList | R593.242; 目的:探讨Toll样受体3(TLR3)激活对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植治疗狼疮性肾炎(LN)的效果,并初步阐明其作用机制.方法:培养hUC-MSCs并鉴定,10 mg·L-1聚肌胞苷酸处理hUC-MSCs.45只MRL/Lpr雌性小鼠随机分为模型组、hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组,另取15只C57BL/6C雌性小鼠作为对照组;小鼠尾静脉注射hUC-MSCs或聚肌胞苷酸处理的hUC-MSCs.给药后,每2周测定1次小鼠24 h尿蛋白水平;8周后采血并取肾组织,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体水平和肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素17(IL-17)水平.HE染色和PAS染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,免疫荧光染色检测各组小鼠肾组织中IgG和补体C3沉积.Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和自噬相关蛋白表达水平.结果:hUC-MSCs具有典型的间充质干细胞特征.与对照组比较,模型组小鼠血清中抗dsDNA抗体水平明显升高(P<0.05),肾组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显升高(P<0.05),肾组织中出现肾小球系膜细胞增生、肾小管萎缩坏死和炎症细胞浸润现象,肾组织中IgG和C3沉积明显(P<0.05),肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和酵母ATG6的同系物(Beclin1)蛋白表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,给药4周时TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平降低(P<0.05),6和8周时hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平均明显降低(P<0.05),血清中抗dsDNA抗体水平降低(P<0.05),肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显降低(P<0.05),肾组织病变有一定程度的改善,肾组织中IgG和C3沉积减少(P<0.05),且TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织改善更为明显;hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显降低(P<0.05),LC3 |
| Author | 杨舟 王小波 詹锋 刘颖 |
| AuthorAffiliation | 海南省人民医院 海南医学院附属海南医院风湿免疫科,海南 海口570311%海南省人民医院 海南医学院附属海南医院康复医学科,海南 海口570311 |
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| DOI | 10.13481/j.1671-587X.20220520 |
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| Issue | 5 |
| Keywords | 脐带间充质干细胞 小鼠 狼疮性肾炎 Toll样受体3 |
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| PublicationTitle | 吉林大学学报（医学版） |
| PublicationTitle_FL | Journal of Jilin University(Medicine Edition) |
| PublicationYear | 2022 |
| Publisher | 海南省人民医院 海南医学院附属海南医院风湿免疫科,海南 海口570311%海南省人民医院 海南医学院附属海南医院康复医学科,海南 海口570311 |
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