苗药验方四大血对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡和焦亡的影响

• Published in: 南方医科大学学报 Vol. 41; no. 10; pp. 1473 - 1483
• Main Authors: 吴宁, 袁桃花, 姬进忠, 程瑶, 李明义, 梁玺, 孙见飞, 刘华, 吴昌学
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 贵州医科大学基础医学院,贵州 贵阳 550025%贵州医科大学临床医学院,贵州 贵阳 550025%贵州医科大学医学分子生物学重点实验室,贵州 贵阳 550004 2021
• Subjects: 苗药方四大血;类风湿性关节炎;细胞凋亡;细胞焦亡;数据挖掘;分子对接
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2021.10.05

目的 探讨苗药验方四大血(SX)对人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡和焦亡的影响.方法 数据库检索RA及凋亡、焦亡相关靶蛋白;韦恩软件分析获得与RA相关凋亡及焦亡蛋白;RA-凋亡-焦亡靶蛋白互作(PPI)网络构建以获取RA中凋亡和焦亡重要靶蛋白;Autodock vina软件进行分子对接验证SX主要活性成分与凋亡和焦亡相关蛋白的结合能力,并通过PyMoL软件进行可视化.人源第2代RA-FLSs MH7A细胞检测SX对MH7A细胞抑制率后分为空白对照组、雷公藤多甘片阳性对照组(TGT组,5 mg/L)及5、10、20、40 mg/L SX组,采用Wound-healing实验、Transwell法、ELISA法及Western blot法分别检测MH7A细胞的迁移和侵袭能力、凋亡和焦亡相关蛋白.结果 获得RA相关凋亡靶蛋白9个、焦亡靶蛋白15个、RA-凋亡-焦亡重叠靶蛋白4个,SX主要活性成分与TNF-α、Fas、Bax等靶蛋白均具有较高亲和力;与空白组相比,给药处理24、48、72 h,随着SX浓度增加,对MH7A细胞抑制率增加(P<0.05),药物作用6、12、24 h,同一时间点内MH7A细胞划痕修复率随SX浓度增加而减少(P<0.05);药物作用24 h,20、40 mg/L SX组MH7A细胞侵袭个数减少(P<0.05);20、40 mg/L SX组和TGT组TNF-α、IL-1β、IL-18的表达水平均下降(P<0.05);20、40 mg/L SX组Bax/Bcl-2比值均增加(P<0.05);5、40 mg/L SX组Caspase-1表达量均减少(P<0.05);20、40 mg/L SX组Fas和FasL表达量均增加(P<0.05).结论 SX可诱导MH7A细胞凋亡、抑制其焦亡,减缓炎症反应,其作用机制可能与下调TNF-α、IL-1β、IL-18细胞因子水平,上调Bax、Fas、FasL,抑制Bcl-2和Caspase-1蛋白表达有关.