自固定化酶法制备石莼寡糖工艺研究
TS262.6; 为提高石莼寡糖产量,该研究通过基因工程技术构建带有铁蛋白标签的石莼多糖裂解酶(Ulvan-F)质粒载体,通过其独特的自组装特性,制备自固定化酶并应用于酶解石莼多糖.采用单因素试验和响应面试验优化其发酵工艺条件,并对其制备石莼寡糖的重复使用率、得率及分子质量进行测定.结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶解温度25℃,酶解pH 9.0,底物浓度2.5％.在此优化条件下,石莼寡糖得率为27.76 mg/g,Ulvan-F重复10次循环后依旧保持43.77％的活性,其制备石莼寡糖总得率为165.43 mg/g,比传统游离酶制备石莼寡糖得率(117.82 mg/g)提高了40.41％,Ul...
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| Published in | 中国酿造 Vol. 44; no. 1; pp. 240 - 246 |
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| Main Authors | , , , , , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Chinese |
| Published |
自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005
25.01.2025
厦门海洋职业技术学院,福建厦门 361002%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002 福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002 |
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 0254-5071 |
| DOI | 10.11882/j.issn.0254-5071.2025.01.035 |
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| Abstract | TS262.6; 为提高石莼寡糖产量,该研究通过基因工程技术构建带有铁蛋白标签的石莼多糖裂解酶(Ulvan-F)质粒载体,通过其独特的自组装特性,制备自固定化酶并应用于酶解石莼多糖.采用单因素试验和响应面试验优化其发酵工艺条件,并对其制备石莼寡糖的重复使用率、得率及分子质量进行测定.结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶解温度25℃,酶解pH 9.0,底物浓度2.5％.在此优化条件下,石莼寡糖得率为27.76 mg/g,Ulvan-F重复10次循环后依旧保持43.77％的活性,其制备石莼寡糖总得率为165.43 mg/g,比传统游离酶制备石莼寡糖得率(117.82 mg/g)提高了40.41％,Ulvan-F酶解产物平均分子质量为492.36 Da.Ulvan-F具有在低速离心条件下即可纯化、易与产物分离及可重复使用的优点,能应用于宏量制备石莼寡糖的工业生产中. |
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| AbstractList | TS262.6; 为提高石莼寡糖产量,该研究通过基因工程技术构建带有铁蛋白标签的石莼多糖裂解酶(Ulvan-F)质粒载体,通过其独特的自组装特性,制备自固定化酶并应用于酶解石莼多糖.采用单因素试验和响应面试验优化其发酵工艺条件,并对其制备石莼寡糖的重复使用率、得率及分子质量进行测定.结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶解温度25℃,酶解pH 9.0,底物浓度2.5％.在此优化条件下,石莼寡糖得率为27.76 mg/g,Ulvan-F重复10次循环后依旧保持43.77％的活性,其制备石莼寡糖总得率为165.43 mg/g,比传统游离酶制备石莼寡糖得率(117.82 mg/g)提高了40.41％,Ulvan-F酶解产物平均分子质量为492.36 Da.Ulvan-F具有在低速离心条件下即可纯化、易与产物分离及可重复使用的优点,能应用于宏量制备石莼寡糖的工业生产中. |
| Abstract_FL | To increase the yield of ulva oligosaccharides,the ulva polysaccharide lyase with ferritin tag(Ulvan-F)plasmid vector was constructed by genetic engineering.The self-immobilized enzyme was prepared by leveraging its unique self-assembly properties,and applied to the enzymatic hy-drolysis of ulva polysaccharides.The fermentation conditions were optimized by single-factor experiments and response surface methodology,and the reuse rate,yield and molecular mass of ulva oligosaccharides were measured.The results showed that the optimal enzymatic hydrolysis conditions were enzymatic hydrolysis temperature 25 ℃,pH 9.0,and substrate concentration 2.5％.Under these optimized conditions,the ulva oligosaccharides yield reached 27.76 mg/g,the activity of Ulvan-F was still 43.77％after 10 cycles,and the total yield of ulva oligosaccharides was 165.43 mg/g,which was 40.41％higher than that prepared by traditional free enzyme(117.82 mg/g).The average molecular mass of the hydrolysis products by Ulvan-F was 492.36 Da.The Ulvan-F had several advantages,including easy purification under low-speed centrifugation condition,efficient separation from the product,and recycle,which could be applied in the industrial production of ulva polysaccharides macropreparation. |
| Author | 张怡评 洪专 杨青 谢全灵 陈伟珠 晋文慧 方华 蒋娴 张龙涛 吴静 |
| AuthorAffiliation | 福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002;自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005;厦门海洋职业技术学院,福建厦门 361002%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002 |
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| Author_FL | CHEN Weizhu FANG Hua XIE Quanling JIN Wenhui JIANG Xian HONG Zhuan ZHANG Longtao ZHANG Yiping WU Jing YANG Qing |
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| DOI | 10.11882/j.issn.0254-5071.2025.01.035 |
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| Issue | 1 |
| Keywords | response surface method ferritin 酶解工艺优化 ulva oligosaccharide enzymatic hydrolysis technology optimization 无载体固定化 响应面法 铁蛋白 no carrier immobilization 石莼寡糖 |
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| PublicationTitle | 中国酿造 |
| PublicationTitle_FL | China Brewing |
| PublicationYear | 2025 |
| Publisher | 自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005 厦门海洋职业技术学院,福建厦门 361002%自然资源部第三海洋研究所海洋生物资源开发利用工程技术创新中心,福建厦门 361005%福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002 福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002 |
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