腎臓移植におけるヒトリンパ球を使用した高感度クロスマッチ検査の検討
臓器移植では，液性拒絶反応の免疫学的評価としてドナー特異的抗HLA抗体（donor-specific HLA antibodies; DSA）を検出することが重要であると考えられている。本研究では，flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test（FCXM-IgG）検査法および解析法の統一化に向けた基礎的検討を行った。東京女子医科大学腎臓外科に外来受診された生体腎臓移植希望患者78症例とドナーリンパ球を使用し，FCXM-IgGとLABScreen single-IgGを測定した。FCXM-IgG MESFとLABScreen single-IgG nM...
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| Published in | Japanese Journal of Medical Technology Vol. 65; no. 1; pp. 70 - 77 |
|---|---|
| Main Authors | , , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会
25.01.2016
日本臨床衛生検査技師会 Japanese Association of Medical Technologists |
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 0915-8669 2188-5346 |
| DOI | 10.14932/jamt.15-18 |
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| Abstract | 臓器移植では，液性拒絶反応の免疫学的評価としてドナー特異的抗HLA抗体（donor-specific HLA antibodies; DSA）を検出することが重要であると考えられている。本研究では，flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test（FCXM-IgG）検査法および解析法の統一化に向けた基礎的検討を行った。東京女子医科大学腎臓外科に外来受診された生体腎臓移植希望患者78症例とドナーリンパ球を使用し，FCXM-IgGとLABScreen single-IgGを測定した。FCXM-IgG MESFとLABScreen single-IgG nMFIの比較では，Linear valuesとChannel valuesにおいてTcell・Bcell-IgG共に相関係数およそ0.8と良好であった。本研究の結果から，LABScreen single-IgGで検出されるnatural antibodyなどの影響も推測されたが，本研究において良好な相関性が得られたことによりそれぞれの蛍光強度から近似曲線を作成し定量評価できる可能性が期待される。 |
|---|---|
| AbstractList | 「要旨」臓器移植では, 液性拒絶反応の免疫学的評価としてドナー特異的抗HLA抗体(donor-specific HLA antibodies; DSA)を検出することが重要であると考えられている. 本研究では, flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test (FCXM-IgG) 検査法および解析法の統一化に向けた基礎的検討を行った. 東京女子医科大学腎臓外科に外来受診された生体腎臓移植希望患者78症例とドナーリンパ球を使用し, FCXM-IgGと LABScreen single-IgG を測定した. FCXM-IgG MESF と LABScreen single-IgG nMFI の比較では, Linear values と Channel values において Tcell・Bcell-IgG 共に相関係数およそ0.8と良好であった. 本研究の結果から, LABScreen single-IgG で検出される natural antibody などの影響も推測されたが, 本研究において良好な相関性が得られたことによりそれぞれの蛍光強度から近似曲線を作成し定量評価できる可能性が期待される. In renal transplantation, it is immunologically critical to detect donor-specific HLA antibodies (DSA) at a highly sensitive level before transplantation to avoid antibody-mediated acute rejection. We conducted basic research on refining the conventional flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG (FCXM-IgG) test to detect HLA antibodies at a highly sensitive level and on standardizing this novel procedure. We measured the levels of FCXM-IgG and LABScreen single-IgG using human donor lymphocytes in serum samples of 78 renal transplant recipients who visited the outpatient clinic of the Department of Surgery III at Tokyo Women’s Medical University. The correlation coefficients between FCXM-IgG MFI level and LABScreen single-IgG nMFI level were as good as about 0.8 for both B and T cells. These coefficients measured in linear values were almost equal to those measured in channel values. Even if we consider that the LABScreen single-IgG level could be affected by the coexistence of natural antibodies to some extent, we demonstrated in this study that the measured levels of FCXM-IgG and LABScreen single-IgG with fluorescence intensity correlated well with each other. 臓器移植では，液性拒絶反応の免疫学的評価としてドナー特異的抗HLA抗体（donor-specific HLA antibodies; DSA）を検出することが重要であると考えられている。本研究では，flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test（FCXM-IgG）検査法および解析法の統一化に向けた基礎的検討を行った。東京女子医科大学腎臓外科に外来受診された生体腎臓移植希望患者78症例とドナーリンパ球を使用し，FCXM-IgGとLABScreen single-IgGを測定した。FCXM-IgG MESFとLABScreen single-IgG nMFIの比較では，Linear valuesとChannel valuesにおいてTcell・Bcell-IgG共に相関係数およそ0.8と良好であった。本研究の結果から，LABScreen single-IgGで検出されるnatural antibodyなどの影響も推測されたが，本研究において良好な相関性が得られたことによりそれぞれの蛍光強度から近似曲線を作成し定量評価できる可能性が期待される。 臓器移植では，液性拒絶反応の免疫学的評価としてドナー特異的抗HLA抗体（donor-specific HLA antibodies; DSA）を検出することが重要であると考えられている。本研究では，flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test（FCXM-IgG）検査法および解析法の統一化に向けた基礎的検討を行った。東京女子医科大学腎臓外科に外来受診された生体腎臓移植希望患者78症例とドナーリンパ球を使用し，FCXM-IgGとLABScreen single-IgGを測定した。FCXM-IgG MESFとLABScreen single-IgG nMFIの比較では，Linear valuesとChannel valuesにおいてTcell・Bcell-IgG共に相関係数およそ0.8と良好であった。本研究の結果から，LABScreen single-IgGで検出されるnatural antibodyなどの影響も推測されたが，本研究において良好な相関性が得られたことによりそれぞれの蛍光強度から近似曲線を作成し定量評価できる可能性が期待される。 |
| Author | 安尾, 美年子 中島, 一朗 小林, 悠梨 石塚, 敏 渕之上, 昌平 岩藤, 和宏 三浦, ひとみ |
| Author_FL | YASUO Mineko MIURA Hitomi ISHIZUKA Tsutomu IWADOH Kazuhiro NAKAJIMA Ichiro FUCHINOUE Shohei KOBAYASHI Yuri |
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| Copyright | 2016 一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会 |
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| CorporateAuthor | 東京女子医科大学中央検査部移植関連検査室 東京女子医科大学腎臓外科 |
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| DOI | 10.14932/jamt.15-18 |
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| DocumentTitleAlternate | A novel procedure of flow cytometry lymphocyte crossmatch test with high sensitivity using human lymphocytes in renal transplantation |
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| PublicationTitle | Japanese Journal of Medical Technology |
| PublicationTitleAlternate | 医学検査 |
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| PublicationYear | 2016 |
| Publisher | 一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会 日本臨床衛生検査技師会 Japanese Association of Medical Technologists |
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| References | 2) Terasaki PI, Mcclelland JD: “Microdroplet assay of human serum cytotoxins,” Nature, 1964; 204: 998–1000. 12) ASHI Laboratory Manual, 4th Edition. 6) Morales-Buenrostro LE et al.: ““Natural” human leukocyte antigen antibodies found in nonalloimmunized healthy males,” Transplantation, 2008; 86: 1111–1115. 8) El-Awar N et al.: “Epitopes of human leukocyte antigen class I antibodies found in sera of normal healthy males and cord blood,” Human Immunology, 2009; 70: 844–853. 16) Lobo PI et al.: “Improved specificity and sensitivity when using pronase-digested lymphocytes to perform flow-cytometric crossmatch prior to renal transplantation,” Transplant International, 2002; 15: 563–569. 10) 矢澤 浩治，他：「リンパ球クロスマッチにおけるimmunocomplex capture fluorescence analysis（ICFA）の有用性についての検討」，移植，2013; 48: 236–243. 14) Abe M et al.: “Postoperative production of anti-donor antibody and chronic rejection in renal transplantation,” Transplantation, 1997; 63: 1616–1619. 4) Lobo PI et al.: “The use of pronase-digested human leukocytes to improve specificity of the flow cytometric crossmatch,” Transplant International, 1995; 8: 472–480. 17) Hetrick SJ et al.: “Impact of pronase on flow cytometric crossmatch outcome,” Hum Immunol, 2011; 72: 330–336. 3) Patel R, Terasaki PI: “Significance of the positive crossmatch test in kidney transplantation,” N Engl J Med, 1969; 280: 735–739. 9) Fujiwara K, et al.: “Application of bead array technology to simultaneous detection of human leucocyte antigen and human platelet antigen antigen antibodies,” Vox Sang, 2009; 96: 244–251. 13) Schwartz A et al.: “Formalization of the MESF unit of fluorescence intensity,” Cytometry Part B: Clinical Cytometry, 2004; 57: 1–6. 15) 石塚, 敏，他：「リツキシマブを投与した症例におけるプロテアーゼ処理フローサイトメトリークロスマッチテストの検討」，移植，2007; 42: 143–149. 7) El-Awar N et al.：“Epitopes of HLA antibodies found in sera of normal healthy males and cord blood,” Clinical Transplants, 2008; 199–214. 5) Tait BD et al.: “Review article: Luminex technology for HLA antibody detection in organ transplantation,” Nephrology (Carlton), 2009; 14: 247–254. 18) Bray RA: “Lymphocyte crossmatching by flow cytometry,” Methods in Molecular Biology, 2013; 1034: 285–296. 1) 石塚, 敏：「臓器移植におけるHLA抗体検査について」，日本組織適合性学会，2013; 20: 121–129. 11) United Network for Organ Sharing (UNOS). Guidelines. http://www.unos.org/PoliciesandBylaws2/policies/pdfs/policy_109.pdf. Updated June 25, 2004. Accessed September 23, 2008. |
| References_xml | – reference: 4) Lobo PI et al.: “The use of pronase-digested human leukocytes to improve specificity of the flow cytometric crossmatch,” Transplant International, 1995; 8: 472–480. – reference: 15) 石塚, 敏，他：「リツキシマブを投与した症例におけるプロテアーゼ処理フローサイトメトリークロスマッチテストの検討」，移植，2007; 42: 143–149. – reference: 3) Patel R, Terasaki PI: “Significance of the positive crossmatch test in kidney transplantation,” N Engl J Med, 1969; 280: 735–739. – reference: 18) Bray RA: “Lymphocyte crossmatching by flow cytometry,” Methods in Molecular Biology, 2013; 1034: 285–296. – reference: 7) El-Awar N et al.：“Epitopes of HLA antibodies found in sera of normal healthy males and cord blood,” Clinical Transplants, 2008; 199–214. – reference: 11) United Network for Organ Sharing (UNOS). Guidelines. http://www.unos.org/PoliciesandBylaws2/policies/pdfs/policy_109.pdf. Updated June 25, 2004. Accessed September 23, 2008. – reference: 2) Terasaki PI, Mcclelland JD: “Microdroplet assay of human serum cytotoxins,” Nature, 1964; 204: 998–1000. – reference: 16) Lobo PI et al.: “Improved specificity and sensitivity when using pronase-digested lymphocytes to perform flow-cytometric crossmatch prior to renal transplantation,” Transplant International, 2002; 15: 563–569. – reference: 17) Hetrick SJ et al.: “Impact of pronase on flow cytometric crossmatch outcome,” Hum Immunol, 2011; 72: 330–336. – reference: 9) Fujiwara K, et al.: “Application of bead array technology to simultaneous detection of human leucocyte antigen and human platelet antigen antigen antibodies,” Vox Sang, 2009; 96: 244–251. – reference: 12) ASHI Laboratory Manual, 4th Edition. – reference: 1) 石塚, 敏：「臓器移植におけるHLA抗体検査について」，日本組織適合性学会，2013; 20: 121–129. – reference: 8) El-Awar N et al.: “Epitopes of human leukocyte antigen class I antibodies found in sera of normal healthy males and cord blood,” Human Immunology, 2009; 70: 844–853. – reference: 13) Schwartz A et al.: “Formalization of the MESF unit of fluorescence intensity,” Cytometry Part B: Clinical Cytometry, 2004; 57: 1–6. – reference: 5) Tait BD et al.: “Review article: Luminex technology for HLA antibody detection in organ transplantation,” Nephrology (Carlton), 2009; 14: 247–254. – reference: 6) Morales-Buenrostro LE et al.: ““Natural” human leukocyte antigen antibodies found in nonalloimmunized healthy males,” Transplantation, 2008; 86: 1111–1115. – reference: 14) Abe M et al.: “Postoperative production of anti-donor antibody and chronic rejection in renal transplantation,” Transplantation, 1997; 63: 1616–1619. – reference: 10) 矢澤 浩治，他：「リンパ球クロスマッチにおけるimmunocomplex capture fluorescence analysis（ICFA）の有用性についての検討」，移植，2013; 48: 236–243. |
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| SubjectTerms | donor-specific HLA antibodies (DSA) flow cytometry lymphocyte crossmatch-IgG test (FCXM-IgG) HLA特異性抗体検査 human leukocyte antigen (HLA) LABScreen Single Antigen IgG Test (LABScreen single-IgG) lymphocyte cytotoxicity crossmatch test (LCT-XM) ドナー特異的抗HLA抗体 フローサイトメトリークロスマッチ検査 リンパ球細胞傷害性試験 組織適合性抗原 |
| Title | 腎臓移植におけるヒトリンパ球を使用した高感度クロスマッチ検査の検討 |
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