化学発光酵素免疫測定法を用いたマトリックスメタロプロテイナーゼ-3試薬の評価
マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の測定には主にラテックス凝集比濁法（LTIA法）が用いられているが，健常小児においては大半が測定感度以下となるなど，評価困難な場合がある。今回，LTIA法より高感度である化学発光酵素免疫法（CLEIA法）を原理とした試薬（本試薬）について基礎的検討を行い，非特異反応の頻度を2種類のLTIA法試薬と比較して有用性を評価した。基礎的検討では，併行精度はCV 1.1–1.6%，再現精度はCV 1.1–1.3%と良好な結果であった。検出限界は0.041 ng/mL，定量限界（10%CV）は0.092 ng/mLと，LTIA法と比べ，約100倍の感度が得...
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| Published in | Japanese Journal of Medical Technology Vol. 67; no. 1; pp. 37 - 43 |
|---|---|
| Main Authors | , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会
25.01.2018
日本臨床衛生検査技師会 Japanese Association of Medical Technologists |
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 0915-8669 2188-5346 |
| DOI | 10.14932/jamt.17-79 |
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| Abstract | マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の測定には主にラテックス凝集比濁法（LTIA法）が用いられているが，健常小児においては大半が測定感度以下となるなど，評価困難な場合がある。今回，LTIA法より高感度である化学発光酵素免疫法（CLEIA法）を原理とした試薬（本試薬）について基礎的検討を行い，非特異反応の頻度を2種類のLTIA法試薬と比較して有用性を評価した。基礎的検討では，併行精度はCV 1.1–1.6%，再現精度はCV 1.1–1.3%と良好な結果であった。検出限界は0.041 ng/mL，定量限界（10%CV）は0.092 ng/mLと，LTIA法と比べ，約100倍の感度が得られた。測定範囲は2,575 ng/mLまでの直線性が得られた。添加回収試験では，99–107%の回収率が得られ，共存物質の影響は特に認められなかった。2種類のLTIA法試薬との相関は，それぞれr = 0.995（n = 305），r = 0.989（n = 305）と良好な相関を示した。非特異反応を起こしやすいと考えられる検査値異常パネル（336件）を3試薬で測定すると，測定値が乖離した検体が10例認められたが，本試薬では希釈直線性不良のものは認められなかった。本試薬の基礎的検討は良好で，LTIA法試薬との相関も良好であり，非特異反応も軽減されていたことから，本試薬はMMP-3測定試薬として有用である。 |
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| AbstractList | The latex turbidimetric immunoassay (LTIA) has been used for the measurement of matrix metalloproteinase (MMP)-3 levels. However, in the cases of healthy infants, the levels of serum MMP-3 are too low to detect by the LTIA method. In this study, we evaluated the analytical performance of a newly developed chemiluminescent enzyme immunoassay (CLEIA) kit, and compared the frequency of nonspecific reactions between the CLEIA and LTIA kits. The within-run and between-run coefficients of variation (CVs) for the newly developed CLEIA kit ranged from 1.1% to 1.6% and from 1.1% to 1.3%, respectively. The detection limit and quantitation limit (at 10% CV) of this new kit were 0.041 and 0.092 ng/mL, respectively. The assay results for the serially diluted sample of MMP-3 showed excellent linearity up to 2,575 ng/mL. The % recovery in the spiked recovery test was in the range from 99% to 107%. An interference test was performed, but no significant interference was observed. Moreover, there was a good correlation between the CLEIA kit and the two LTIA kits (r = 0.995 and r = 0.989). The serum MMP-3 levels were measured in 336 samples with various immunoserological abnormalities using the CLEIA kit and the two LTIA kits. There were 10 samples that showed value divergence among the 3 kits owing to a nonspecific reaction, but there was no sample that showed poor dilution linearity in measurements using the CLEIA kit. On the basis of these results, this newly developed CLEIA kit is useful as a measurement reagent for MMP-3.
マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の測定には主にラテックス凝集比濁法（LTIA法）が用いられているが，健常小児においては大半が測定感度以下となるなど，評価困難な場合がある。今回，LTIA法より高感度である化学発光酵素免疫法（CLEIA法）を原理とした試薬（本試薬）について基礎的検討を行い，非特異反応の頻度を2種類のLTIA法試薬と比較して有用性を評価した。基礎的検討では，併行精度はCV 1.1–1.6%，再現精度はCV 1.1–1.3%と良好な結果であった。検出限界は0.041 ng/mL，定量限界（10%CV）は0.092 ng/mLと，LTIA法と比べ，約100倍の感度が得られた。測定範囲は2,575 ng/mLまでの直線性が得られた。添加回収試験では，99–107%の回収率が得られ，共存物質の影響は特に認められなかった。2種類のLTIA法試薬との相関は，それぞれr = 0.995（n = 305），r = 0.989（n = 305）と良好な相関を示した。非特異反応を起こしやすいと考えられる検査値異常パネル（336件）を3試薬で測定すると，測定値が乖離した検体が10例認められたが，本試薬では希釈直線性不良のものは認められなかった。本試薬の基礎的検討は良好で，LTIA法試薬との相関も良好であり，非特異反応も軽減されていたことから，本試薬はMMP-3測定試薬として有用である。 「要旨」 マトリックスメタロプロテイナーゼ-3(MMP-3)の測定には主にラテックス凝集比濁法(LTIA法)が用いられているが, 健常小児においては大半が測定感度以下となるなど, 評価困難な場合がある. 今回, LTIA法より高感度である化学発光酵素免疫法(CLEIA法)を原理とした試薬(本試薬)について基礎的検討を行い, 非特異反応の頻度を2種類のLTIA法試薬と比較して有用性を評価した. 基礎的検討では, 併行精度はCV 1.1-1.6%, 再現精度はCV 1.1-1.3%と良好な結果であった. 検出限界は0.041ng/mL, 定量限界(10%CV)は0.092ng/mLと, LTIA法と比べ, 約100倍の感度が得られた. 測定範囲は2, 575ng/mLまでの直線性が得られた. 添加回収試験では, 99-107%の回収率が得られ, 共存物質の影響は特に認められなかった. 2種類のLTIA法試薬との相関は, それぞれr=0.995(n=305), r=0.989(n=305)と良好な相関を示した. 非特異反応を起こしやすいと考えられる検査値異常パネル(336件)を3試薬で測定すると, 測定値が乖離した検体が10例認められたが, 本試薬では希釈直線性不良のものは認められなかった. 本試薬の基礎的検討は良好で, LTIA法試薬との相関も良好であり, 非特異反応も軽減されていたことから, 本試薬はMMP-3測定試薬として有用である. マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の測定には主にラテックス凝集比濁法（LTIA法）が用いられているが，健常小児においては大半が測定感度以下となるなど，評価困難な場合がある。今回，LTIA法より高感度である化学発光酵素免疫法（CLEIA法）を原理とした試薬（本試薬）について基礎的検討を行い，非特異反応の頻度を2種類のLTIA法試薬と比較して有用性を評価した。基礎的検討では，併行精度はCV 1.1–1.6%，再現精度はCV 1.1–1.3%と良好な結果であった。検出限界は0.041 ng/mL，定量限界（10%CV）は0.092 ng/mLと，LTIA法と比べ，約100倍の感度が得られた。測定範囲は2,575 ng/mLまでの直線性が得られた。添加回収試験では，99–107%の回収率が得られ，共存物質の影響は特に認められなかった。2種類のLTIA法試薬との相関は，それぞれr = 0.995（n = 305），r = 0.989（n = 305）と良好な相関を示した。非特異反応を起こしやすいと考えられる検査値異常パネル（336件）を3試薬で測定すると，測定値が乖離した検体が10例認められたが，本試薬では希釈直線性不良のものは認められなかった。本試薬の基礎的検討は良好で，LTIA法試薬との相関も良好であり，非特異反応も軽減されていたことから，本試薬はMMP-3測定試薬として有用である。 |
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| References | 10) 北秋 翔子，他：「ラテックス凝集比濁法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3測定試薬における非特異反応の解析」，臨床病理，2015; 63: 427–434. 18) 坂西 陽子，他：「ラテックス免疫比濁法を用いたマトリックスプロテアーゼ-3（MMP-3）測定における非特異反応の解析」，臨床病理，2010; 58(Sup 1): 252. 1) 高橋 伸典，石黒 直樹：「関節リウマチの疾患活動性を見極める」，Rheumatology Clinical Research, 2014; 3: 154–159. 14) 日本臨床化学会クオリティマネジメント専門委員会：「定量分析法における検出限界および定量限界の評価法」，臨床化学，2006; 35: 280–294. 11) 和田 友香，他：「多関節型若年性関節リウマチにおける血清中MMP-3の変動について」，小児科臨床，2004; 57: 1091–1096. 13) 川合 博：「若年性特発性関節炎―少関節型の診断と治療」，小児科診療，2005; 51: 611–617. 17) 氏家 真二，他：「改良MMP-3測定試薬の基本性能評価」，医学と薬学，2012; 67: 741–747. 6) Ally MM et al.: “Serum matrix metalloproteinase-3 in comparison with acute phase proteins as a marker of disease activity and radiographic damage in early rheumatoid arthritis,” Mediators Inflamm, 2013; 183653. 9) 渡辺 勝紀，他：「ラテックス凝集免疫比濁法における干渉反応の解析」，JCCLA, 2001; 26: 26–32. 5) 上村 裕子，他：「関節リウマチの活動性把握における血清MMP-3測定の有用性」，臨床病理，2015; 63: 1357–1364. 15) 林, 伸英，他：「新しいラテックス凝集比濁法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3測定試薬の検討」，医学と薬学，2012; 68: 911–918. 12) Matsuyama T: “Tissue inhibitor of metalloproteinases-1 and matrix metalloproteinase-3 in Japanese healthy children and in Kawasaki disease and their clinical usefulness in juvenile rheumatoid arthritis,” Pediatr Int, 1999; 41: 239–245. 3) 長澤 逸人，他：「関節リウマチ患者における血清マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の臨床的意義」，炎症・再生，2005; 25: 60–64. 16) 大久保 学，他：「マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP-3）本試薬の性能評価」，JJCLA, 2014; 39: 135–140. 8) 北川 文彦，他：「新しいラテックス法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）測定試薬の有用性評価」，臨床化学，2004; 33: 183–186. 2) 桃原 茂樹，山中 寿：「【関節破壊のバイオマーカー】MMP-3（matrix metalloproteinase-3）」，Keynote R・A，2014; 2: 75–80. 4) Urata Y et al.: “Treating to target matrix metalloproteinase 3 normalisation together with disease activity score below 2.6 yields better effects than each alone in rheumatoid arthritis patients: T-4 Study,” Ann Rheum Dis, 2012; 71: 534–540. 7) 河本 智子，他：「ELISA法による血清中マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）測定試薬の評価」，医学と薬学，2002; 48: 719–726. |
| References_xml | – reference: 14) 日本臨床化学会クオリティマネジメント専門委員会：「定量分析法における検出限界および定量限界の評価法」，臨床化学，2006; 35: 280–294. – reference: 9) 渡辺 勝紀，他：「ラテックス凝集免疫比濁法における干渉反応の解析」，JCCLA, 2001; 26: 26–32. – reference: 12) Matsuyama T: “Tissue inhibitor of metalloproteinases-1 and matrix metalloproteinase-3 in Japanese healthy children and in Kawasaki disease and their clinical usefulness in juvenile rheumatoid arthritis,” Pediatr Int, 1999; 41: 239–245. – reference: 5) 上村 裕子，他：「関節リウマチの活動性把握における血清MMP-3測定の有用性」，臨床病理，2015; 63: 1357–1364. – reference: 16) 大久保 学，他：「マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP-3）本試薬の性能評価」，JJCLA, 2014; 39: 135–140. – reference: 2) 桃原 茂樹，山中 寿：「【関節破壊のバイオマーカー】MMP-3（matrix metalloproteinase-3）」，Keynote R・A，2014; 2: 75–80. – reference: 18) 坂西 陽子，他：「ラテックス免疫比濁法を用いたマトリックスプロテアーゼ-3（MMP-3）測定における非特異反応の解析」，臨床病理，2010; 58(Sup 1): 252. – reference: 4) Urata Y et al.: “Treating to target matrix metalloproteinase 3 normalisation together with disease activity score below 2.6 yields better effects than each alone in rheumatoid arthritis patients: T-4 Study,” Ann Rheum Dis, 2012; 71: 534–540. – reference: 7) 河本 智子，他：「ELISA法による血清中マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）測定試薬の評価」，医学と薬学，2002; 48: 719–726. – reference: 10) 北秋 翔子，他：「ラテックス凝集比濁法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3測定試薬における非特異反応の解析」，臨床病理，2015; 63: 427–434. – reference: 13) 川合 博：「若年性特発性関節炎―少関節型の診断と治療」，小児科診療，2005; 51: 611–617. – reference: 11) 和田 友香，他：「多関節型若年性関節リウマチにおける血清中MMP-3の変動について」，小児科臨床，2004; 57: 1091–1096. – reference: 17) 氏家 真二，他：「改良MMP-3測定試薬の基本性能評価」，医学と薬学，2012; 67: 741–747. – reference: 1) 高橋 伸典，石黒 直樹：「関節リウマチの疾患活動性を見極める」，Rheumatology Clinical Research, 2014; 3: 154–159. – reference: 8) 北川 文彦，他：「新しいラテックス法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）測定試薬の有用性評価」，臨床化学，2004; 33: 183–186. – reference: 6) Ally MM et al.: “Serum matrix metalloproteinase-3 in comparison with acute phase proteins as a marker of disease activity and radiographic damage in early rheumatoid arthritis,” Mediators Inflamm, 2013; 183653. – reference: 3) 長澤 逸人，他：「関節リウマチ患者における血清マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の臨床的意義」，炎症・再生，2005; 25: 60–64. – reference: 15) 林, 伸英，他：「新しいラテックス凝集比濁法によるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3測定試薬の検討」，医学と薬学，2012; 68: 911–918. |
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| StartPage | 37 |
| SubjectTerms | chemiluminescent enzyme immunoassay CLEIA latex turbidimetric immunoassay LTIA matrix metalloproteinase-3 MMP-3 rheumatoid arthritis (RA) 関節リウマチ |
| Title | 化学発光酵素免疫測定法を用いたマトリックスメタロプロテイナーゼ-3試薬の評価 |
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