HLA拘束性T細胞を誘導可能な末梢血モノサイト由来樹状細胞の大量産生法の開発
癌免疫療法ではHLA抗原により提示された癌抗原ペプチド特異的なT細胞を誘導することが最も重要であり，これを誘導するために樹状細胞（DC）が有用である。そこで我々はヒトの単球を生体外で増殖させることにより，少量の末梢血から大量のDCを作成する方法を開発した。末梢血より分離したCD14+単球にレンチウイルスでcMYCとBMI1遺伝子を導入した後，M-CSFとGM-CSFの存在下で培養すると3–5週後に最大1,000倍に増殖させることができた。我々は，この細胞をCD14-MLと命名した。健常人ドナー12人中9人からCD14-MLが樹立でき，CD14-MLにIL-4とTNFαまたはOK432を添加する...
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| Published in | MHC（日本組織適合性学会誌） Vol. 22; no. 1; pp. 37 - 43 |
|---|---|
| Main Authors | , , , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
日本組織適合性学会
2015
|
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 2186-9995 2187-4239 |
| DOI | 10.12667/mhc.22.37 |
Cover
| Abstract | 癌免疫療法ではHLA抗原により提示された癌抗原ペプチド特異的なT細胞を誘導することが最も重要であり，これを誘導するために樹状細胞（DC）が有用である。そこで我々はヒトの単球を生体外で増殖させることにより，少量の末梢血から大量のDCを作成する方法を開発した。末梢血より分離したCD14+単球にレンチウイルスでcMYCとBMI1遺伝子を導入した後，M-CSFとGM-CSFの存在下で培養すると3–5週後に最大1,000倍に増殖させることができた。我々は，この細胞をCD14-MLと命名した。健常人ドナー12人中9人からCD14-MLが樹立でき，CD14-MLにIL-4とTNFαまたはOK432を添加するとDC（CD14-ML-DC）に分化した。このCD14-ML-DCにCMVペプチドあるいはMART1ペプチドを負荷し，末梢血から分離したCD8+T細胞と共培養することで抗原特異的なT細胞ラインを誘導することができた。CD14-ML誘導法はin vitroでヒトの末梢血単球を増殖可能とした初めての技術であり，患者負担を軽減するDC免疫療法への応用が期待できる。 |
|---|---|
| AbstractList | 癌免疫療法ではHLA抗原により提示された癌抗原ペプチド特異的なT細胞を誘導することが最も重要であり, これを誘導するために樹状細胞(DC)が有用である. そこで我々はヒトの単球を生体外で増殖させることにより, 少量の末梢血から大量のDCを作成する方法を開発した. 末梢血より分離したCD14+単球にレンチウイルスでcMYCとBMI1遺伝子を導入した後, M-CSFとGM-CSFの存在下で培養すると3-5週後に最大1,000倍に増殖させることができた. 我々は, この細胞をCD14-MLと命名した. 健常人ドナー12人中9人からCD14-MLが樹立でき, CD14-MLにIL-4とTNFαまたはOK432を添加するとDC(CD14-ML-DC)に分化した. このCD14-ML-DCにCMVペプチドあるいはMART1ペプチドを負荷し, 末梢血から分離したCD8+T細胞と共培養することで抗原特異的なT細胞ラインを誘導することができた. CD14-ML誘導法はin vitroでヒトの末梢血単球を増殖可能とした初めての技術であり, 患者負担を軽減するDC免疫療法への応用が期待できる. 癌免疫療法ではHLA抗原により提示された癌抗原ペプチド特異的なT細胞を誘導することが最も重要であり，これを誘導するために樹状細胞（DC）が有用である。そこで我々はヒトの単球を生体外で増殖させることにより，少量の末梢血から大量のDCを作成する方法を開発した。末梢血より分離したCD14+単球にレンチウイルスでcMYCとBMI1遺伝子を導入した後，M-CSFとGM-CSFの存在下で培養すると3–5週後に最大1,000倍に増殖させることができた。我々は，この細胞をCD14-MLと命名した。健常人ドナー12人中9人からCD14-MLが樹立でき，CD14-MLにIL-4とTNFαまたはOK432を添加するとDC（CD14-ML-DC）に分化した。このCD14-ML-DCにCMVペプチドあるいはMART1ペプチドを負荷し，末梢血から分離したCD8+T細胞と共培養することで抗原特異的なT細胞ラインを誘導することができた。CD14-ML誘導法はin vitroでヒトの末梢血単球を増殖可能とした初めての技術であり，患者負担を軽減するDC免疫療法への応用が期待できる。 |
| Author | 西村, 泰治 冨田, 雄介 松村, 桂子 春田, 美和 千住, 覚 高松, 孝太郎 今村, 悠哉 池田, 徳典 |
| Author_xml | – sequence: 1 fullname: 高松, 孝太郎 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部神経内科学分野 – sequence: 1 fullname: 池田, 徳典 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部神経内科学分野 – sequence: 1 fullname: 今村, 悠哉 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部整形外科学分野 – sequence: 1 fullname: 冨田, 雄介 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部呼吸器内科学分野 – sequence: 1 fullname: 春田, 美和 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部免疫識別学分野 – sequence: 1 fullname: 松村, 桂子 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部免疫識別学分野 – sequence: 1 fullname: 千住, 覚 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部免疫識別学分野 – sequence: 1 fullname: 西村, 泰治 organization: 熊本大学大学院生命科学研究部免疫識別学分野 |
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| Copyright | 2015 日本組織適合性学会 |
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| CorporateAuthor | 熊本大学大学院生命科学研究部神経内科学分野 熊本大学大学院生命科学研究部呼吸器内科学分野 熊本大学大学院生命科学研究部免疫識別学分野 熊本大学大学院生命科学研究部整形外科学分野 |
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| References | 1)Higano CS, Schellhammer PF, Small EJ, et al.: Integrated data from 2 randomized, double-blind, placebo-controlled, phase 3 trials of active cellular immunotherapy with sipuleucel-T in advanced prostate cancer. Cancer (115): 3670–3679, 2009. 11)Watanabe K, Suzuki S, Kamei M, et al.: CD137-guided isolation and expansion of antigen-specific CD8 cells for potential use in adoptive immunotherapy. Int J Hematol (88): 311–320, 2008. 9)Nakahara S, Tsunoda T, Baba T, et al.: Dendritic cells stimulated with a bacterial product, OK-432, efficiently induce cytotoxic T lymphocytes specific to tumor rejection peptide. Cancer Res (63): 4112–4118, 2003. 17)Yoshitake Y, Fukuma D, Yuno A, et al.: Phase II Clinical Trial of Multiple Peptide Vaccination for Advanced Head and Neck Cancer Patients Revealed Induction of Immune Responses and Improved OS. Clin Cancer Res (21): 312–321, 2015. 6)Senju S, Haruta M, Matsumura K, et al.: Generation of dendritic cells and macrophages from human induced pluripotent stem cells aiming at cell therapy. Gene Therapy (18): 874–883, 2011. 16)Uemura H, Fujimoto K, Tanaka M, et al.: APhase I Trial of Vaccination of CA9-Derived Peptides for HLA-A24-Positive Patientswith Cytokine-Refractory Metastatic Renal Cell Carcinoma. Clin Cancer Res (12): 1768–1775, 2006. 5)Freudenthal PS, Steinman RM: The distinct surface of human blood dendritic cells, as observed after an improved isolation method. Proc Natl Acad Sci USA (87): 7703–7707, 1990. 14)Phuphanich S, Wheeler CJ, Rudnick JD, et al.: Phase I trial of a multi-epitope-pulsed dendritic cell vaccine for patients with newly diagnosed glioblastoma. Cancer Immunol Immunother (62): 125–135, 2013. 7)Choi KD, Vodyanik M, Slukvin II: Hematopoietic differentiation and production of mature myeloid cells from human pluripotent stem cells. Nat Protoc (6): 296–313, 2011. 10)Kuzushima K, Hayashi N, Kimura H, et al.: Efficient identification of HLAA*2402-restricted cytomegalovirus-specific CD8 (+) T-cell epitopes by a computer algorithm and an enzyme-linked immunospot assay. Blood (98): 1872–1881, 2001. 12)Kawakami Y, Eliyahu S, Sakaguchi K, et al.: Identification of the immunodominant peptides of the MART-1 human melanoma antigen recognized by the majority of HLA-A2-restricted tumor infiltrating lymphocytes. J Exp Med (180): 347–352, 1994. 13)Oshita C, Takikawa M, Kume A, et al.: Dendritic cell-based vaccination in metastatic melanoma patients: phase II clinical trial. Oncol Rep (28): 1131–1138, 2012. 3)Rosenberg SA, Yang JC, Restifo NP: Cancer immunotherapy: moving beyond current vaccines. Nature Med (10): 909–915, 2004. 19)Suzuki N, Hazama S, Ueno T, et al.: A phase I clinical trial of vaccination with KIF20A-derived peptide in combination with gemcitabine for patients with advanced pancreatic cancer. J Immunother (37): 36–42, 2014. 20)Haruta M, Tomita Y, Imamura Y, et al.: Generation of a large number of functional dendritic cells from human monocytes expanded by forced expression of cMYC plus BMI1. Hum Immunol (74): 1400–1408, 2013. 2)Kantoff PW, Higano CS, Shore ND, et al.: Impact study investigators. Sipuleucel-T immunotherapy for castration-resistant prostate cancer. N Engl J Med (363): 411–422, 2010. 15)Haruta M, Tomita Y, Yuno A, et al.: TAP-deficient human iPS cell-derived myeloid cell lines as unlimited cell source for dendritic cell-like antigen-presenting cells. Gene Ther (20): 504–513, 2013. 18)Schwartzentruber DJ, Lawson DH, Richards JM, Conry RM, Miller DM, Treisman J, et al.: gp100 peptide vaccine and interleukin-2 in patients with advanced melanoma. N Engl J Med (364): 2119–2127, 2011. 8)Itoh T, Ueda Y, Okugawa K, et al.: Streptococcal preparation OK432 promotes functional maturation of human monocytederived dendritic cells. Cancer Immunol Immunother (52): 207–214, 2003. 4)Van Voorhis WC, Hair LS, Steinman RM, et al.: Human dendritic cells. Enrichment and characterization from peripheral blood. J Exp Med (155): 1172–1187, 1982. |
| References_xml | – reference: 3)Rosenberg SA, Yang JC, Restifo NP: Cancer immunotherapy: moving beyond current vaccines. Nature Med (10): 909–915, 2004. – reference: 19)Suzuki N, Hazama S, Ueno T, et al.: A phase I clinical trial of vaccination with KIF20A-derived peptide in combination with gemcitabine for patients with advanced pancreatic cancer. J Immunother (37): 36–42, 2014. – reference: 4)Van Voorhis WC, Hair LS, Steinman RM, et al.: Human dendritic cells. Enrichment and characterization from peripheral blood. J Exp Med (155): 1172–1187, 1982. – reference: 14)Phuphanich S, Wheeler CJ, Rudnick JD, et al.: Phase I trial of a multi-epitope-pulsed dendritic cell vaccine for patients with newly diagnosed glioblastoma. Cancer Immunol Immunother (62): 125–135, 2013. – reference: 17)Yoshitake Y, Fukuma D, Yuno A, et al.: Phase II Clinical Trial of Multiple Peptide Vaccination for Advanced Head and Neck Cancer Patients Revealed Induction of Immune Responses and Improved OS. Clin Cancer Res (21): 312–321, 2015. – reference: 7)Choi KD, Vodyanik M, Slukvin II: Hematopoietic differentiation and production of mature myeloid cells from human pluripotent stem cells. Nat Protoc (6): 296–313, 2011. – reference: 11)Watanabe K, Suzuki S, Kamei M, et al.: CD137-guided isolation and expansion of antigen-specific CD8 cells for potential use in adoptive immunotherapy. Int J Hematol (88): 311–320, 2008. – reference: 9)Nakahara S, Tsunoda T, Baba T, et al.: Dendritic cells stimulated with a bacterial product, OK-432, efficiently induce cytotoxic T lymphocytes specific to tumor rejection peptide. Cancer Res (63): 4112–4118, 2003. – reference: 12)Kawakami Y, Eliyahu S, Sakaguchi K, et al.: Identification of the immunodominant peptides of the MART-1 human melanoma antigen recognized by the majority of HLA-A2-restricted tumor infiltrating lymphocytes. J Exp Med (180): 347–352, 1994. – reference: 15)Haruta M, Tomita Y, Yuno A, et al.: TAP-deficient human iPS cell-derived myeloid cell lines as unlimited cell source for dendritic cell-like antigen-presenting cells. Gene Ther (20): 504–513, 2013. – reference: 5)Freudenthal PS, Steinman RM: The distinct surface of human blood dendritic cells, as observed after an improved isolation method. Proc Natl Acad Sci USA (87): 7703–7707, 1990. – reference: 1)Higano CS, Schellhammer PF, Small EJ, et al.: Integrated data from 2 randomized, double-blind, placebo-controlled, phase 3 trials of active cellular immunotherapy with sipuleucel-T in advanced prostate cancer. Cancer (115): 3670–3679, 2009. – reference: 13)Oshita C, Takikawa M, Kume A, et al.: Dendritic cell-based vaccination in metastatic melanoma patients: phase II clinical trial. Oncol Rep (28): 1131–1138, 2012. – reference: 16)Uemura H, Fujimoto K, Tanaka M, et al.: APhase I Trial of Vaccination of CA9-Derived Peptides for HLA-A24-Positive Patientswith Cytokine-Refractory Metastatic Renal Cell Carcinoma. Clin Cancer Res (12): 1768–1775, 2006. – reference: 8)Itoh T, Ueda Y, Okugawa K, et al.: Streptococcal preparation OK432 promotes functional maturation of human monocytederived dendritic cells. Cancer Immunol Immunother (52): 207–214, 2003. – reference: 20)Haruta M, Tomita Y, Imamura Y, et al.: Generation of a large number of functional dendritic cells from human monocytes expanded by forced expression of cMYC plus BMI1. Hum Immunol (74): 1400–1408, 2013. – reference: 2)Kantoff PW, Higano CS, Shore ND, et al.: Impact study investigators. Sipuleucel-T immunotherapy for castration-resistant prostate cancer. N Engl J Med (363): 411–422, 2010. – reference: 10)Kuzushima K, Hayashi N, Kimura H, et al.: Efficient identification of HLAA*2402-restricted cytomegalovirus-specific CD8 (+) T-cell epitopes by a computer algorithm and an enzyme-linked immunospot assay. Blood (98): 1872–1881, 2001. – reference: 18)Schwartzentruber DJ, Lawson DH, Richards JM, Conry RM, Miller DM, Treisman J, et al.: gp100 peptide vaccine and interleukin-2 in patients with advanced melanoma. N Engl J Med (364): 2119–2127, 2011. – reference: 6)Senju S, Haruta M, Matsumura K, et al.: Generation of dendritic cells and macrophages from human induced pluripotent stem cells aiming at cell therapy. Gene Therapy (18): 874–883, 2011. |
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