キウイフルーツのコラゲナーゼの精製と性質

キウイフルーツ果汁中のコラゲナーゼ活性の存在を新たに明らかにし, さらにその精製を行い, その生化学的性質について検討し, 以下のような結果を得た. (1) 粗抽出液の活性は果肉部にあり, 至適pHは5.0, 至適温度は60℃であった.このことから, 加熱調理の初期の段階で本酵素は強く作用するものと思われた. (2) 粗抽出液を-20℃で1カ月冷凍保存しても安定であり, 調製直後のものの約89%の活性が保持されていた. (3) 粗抽出液のコラゲナーゼ活性は新鮮重量あたり, いちじく, パパイヤ, 生姜, マンゴーより高く, パイナップルより低かった. (4) ゲルろ過クロマトグラフィーの溶出位...

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Published in日本家政学会誌 Vol. 49; no. 1; pp. 5 - 14
Main Authors 堤, ちはる, 中島, 史絵, 田中, 初美, 永弘, 悦子, 吉中, 哲子
Format Journal Article
LanguageEnglish
Japanese
Published 一般社団法人 日本家政学会 01.01.1998
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ISSN0913-5227
1882-0352
DOI10.11428/jhej1987.49.5

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Abstract キウイフルーツ果汁中のコラゲナーゼ活性の存在を新たに明らかにし, さらにその精製を行い, その生化学的性質について検討し, 以下のような結果を得た. (1) 粗抽出液の活性は果肉部にあり, 至適pHは5.0, 至適温度は60℃であった.このことから, 加熱調理の初期の段階で本酵素は強く作用するものと思われた. (2) 粗抽出液を-20℃で1カ月冷凍保存しても安定であり, 調製直後のものの約89%の活性が保持されていた. (3) 粗抽出液のコラゲナーゼ活性は新鮮重量あたり, いちじく, パパイヤ, 生姜, マンゴーより高く, パイナップルより低かった. (4) ゲルろ過クロマトグラフィーの溶出位置から, 本酵素の分子量は約52kDaと推定された.精製酵素のSDS-PAGEでは約60kDaの位置にコラゲナーゼ活性を有する単一バンドが検出された. (5) 精製酵素のコラゲナーゼ活性は, 100mM のEDTAの添加によって著明な減少は認められなかった. (6) 精製酵素のコラゲナーゼ活性は, HgCl2により阻害され, システインによりその阻害は回復した.このことからSH酵素であることが考えられた. (7) 精製酵素はプロテアーゼ活性を示さなかった. (8) キウイフルーツ1個あたり最低量138μgのコラゲナーゼが含まれていた.
AbstractList キウイフルーツ果汁中のコラゲナーゼ活性の存在を新たに明らかにし, さらにその精製を行い, その生化学的性質について検討し, 以下のような結果を得た. (1) 粗抽出液の活性は果肉部にあり, 至適pHは5.0, 至適温度は60℃であった.このことから, 加熱調理の初期の段階で本酵素は強く作用するものと思われた. (2) 粗抽出液を-20℃で1カ月冷凍保存しても安定であり, 調製直後のものの約89%の活性が保持されていた. (3) 粗抽出液のコラゲナーゼ活性は新鮮重量あたり, いちじく, パパイヤ, 生姜, マンゴーより高く, パイナップルより低かった. (4) ゲルろ過クロマトグラフィーの溶出位置から, 本酵素の分子量は約52kDaと推定された.精製酵素のSDS-PAGEでは約60kDaの位置にコラゲナーゼ活性を有する単一バンドが検出された. (5) 精製酵素のコラゲナーゼ活性は, 100mM のEDTAの添加によって著明な減少は認められなかった. (6) 精製酵素のコラゲナーゼ活性は, HgCl2により阻害され, システインによりその阻害は回復した.このことからSH酵素であることが考えられた. (7) 精製酵素はプロテアーゼ活性を示さなかった. (8) キウイフルーツ1個あたり最低量138μgのコラゲナーゼが含まれていた.
Author 永弘, 悦子
田中, 初美
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中島, 史絵
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References Laemmli, U. K. (1970) Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T 4, Nature, 227,680-685
Wilson, E. L., and Burns, D. J. W. (1983) Kiwifruit Juice Processing Using Heat Treatment Techniques and Ultrafiltration, J. Food Sci., 48, 1101-1105
Brocklehurst, K., Baines, B. S., and Malthouse, P. G. (1981) Differences in the Interactions of the Catalytic Groups of the Active Centres of Actinidin and Papain, Biochem. J., 197,739-746
Shimizu, Y., Nakamura, T., Niki, T., Hemmi, H., and Sugamura, K. (1989) Purification and Characterization of a T Lymphocyte-Derived Differentiation Inducing Factor for Human Promyelocytic Cell Line (HL-60) and Its Relationship to Lymphotoxin, Microbiol. Immunol., 33, 489-501
Boland, M. J., and Hardman, M. J. (1972) Kinetic Studies on the Thiol Protease from Actinidia chinensis, FEBS Lett., 27,282-284
松本睦子, 河村フジ子 (1988) ゼラチンゲルにおよぼすキウイフルーツの影響について, 東京家政大研究紀要, 28,123-127
堤ちはる, 三好恵子, 谷 武子, 仙北谷至乃, 殿塚婦美子, 永弘悦子, 河野聡子, 吉中哲子 (1994) キウイフルーツの豚肉軟化効果について, 家政誌, 45,603-607
Arcus, A. C. (1959) Proteolytic Enzyme of Actinidia chinensis, Biochim. Biophys. Acta, 33,242-244
Gallop, P. M., Seifter, S., and Meilman, E. (1957) Studies on Collagen I. The Purification, Assay, and Mode of Activation of Bacterial Collagenase, J. Biol. Chem, 227, 891-906
Moore, S., and Stein, W. H. (1957) A Modified Ninhydrin Reagent for the Photometric Determination of AminoAcid and Related Compounds, J. Biol. Chem., 211,907-913
Yamaguchi, T., Yamashita, Y., Takeda, I., and Kiso, H. (1982) Proteolytic Enzymes in Green Asparagus, Kiwi Fruit and Miut : Occurrence and Partial Characterization, Agric. Biol. Chem., 46, 1983-1986
Liotta, L. A., Thorgeirsson, U. P., and Garbisa, S. (1982) Role of Collagenases in Tumor Cell Invasion, Cancer Metast. Rev., 1,277-288
津田泰夫, 赤池紀扶 (1982) 単一心筋研究の現況, 生体の科学, 33,126-134
Thompson, E. H., Wolf, I. D., and Allen, C. E. (1973) Ginger Rhizome : A New Source of Proteolytic Enzyme, J. Food Sci., 38,652-655
中西洋子, 成瀬明子, 梶田武俊 (1994) 高度に精製したキウイフルーツプロテアーゼ (アクチニジン) の自己消化に及ぼす温度の影響, 家政誌, 45,609-614
Mandle, I., MacLennan, J. D., and Howes, E. L. (1953) Isolation and Characterization of Proteinase and Collagenase from Cl. histolyticum, J. Clin. Invest., 32, 1323-1329
Golub, L. M., Wolff, M., Lee, H. M., McNamara, T. F., Ramamurthy, N. S., Zambon, J., and Giancio, S. (1985) Further Evidence that Tetracyclines Inhibit Collagenase Activity in Human Crevicular Fluid and from Other Mammalian Sources, J. Periodontal Res., 20, 12-23
McDowall, M. A. (1970) Anionic Proteinase from Actinidia chinensis, Eur. J. Biochem., 14,214-221
和辻敏子, 宮本悌次郎 (1985) キウイフルーツの牛肉軟化効果について, 調理科学, 18,128-132
Kimmel, J. R., and Smith, E. L. (1954) Crystalline Papain I. Preparation, Specificity, and Activation, J. Biol. Chem., 207,515-531
曽田 功, 金子美穂, 佐藤隆英, 中川弘毅, 小倉長雄 (1987) キウイフルーツプロテアーゼの利用について, 日食工誌, 34, 36-41
Carne, A., and Moore, C. H. (1978) The, Amino Acid Sequence of the Tryptic Peptides from Actinidin, a Proteolytic Enzyme from the Fruit of Actinidia chinensis, Biochem. J., 173, 73-83
谷口 洋, 江尻一成, 石原建造, 馬場茂明 (1982) 孤. 単離細胞を用いた医化学研究の諸方法. 3. 膵島の培養とその機能, 代謝, 19,299-311
市田隆文, 八木一芳, 山田慎二, 荒川謙二, 井上恭一, 宮際 幹, 小玉修嗣, 岩田和士, 早川太郎 (1988) 肝疾患におけるコラゲナーゼインヒビターの臨床的意義, 肝臓, 29, 410
橋本昭彦, 竹内洋子, 河原有三, 安本教傳 (1991) ショウガ根茎のプロテイナーゼおよびコラゲナーゼ活性, 栄食誌, 44,127-132
橋永文男, 福留哲朗, 伊藤三郎 (1986) キウイフルーツ果実の追熟中のプロテアーゼ活性とその分布, 鹿児島大農学部学術報告, 36, 65-69
References_xml – reference: Brocklehurst, K., Baines, B. S., and Malthouse, P. G. (1981) Differences in the Interactions of the Catalytic Groups of the Active Centres of Actinidin and Papain, Biochem. J., 197,739-746
– reference: Golub, L. M., Wolff, M., Lee, H. M., McNamara, T. F., Ramamurthy, N. S., Zambon, J., and Giancio, S. (1985) Further Evidence that Tetracyclines Inhibit Collagenase Activity in Human Crevicular Fluid and from Other Mammalian Sources, J. Periodontal Res., 20, 12-23
– reference: Mandle, I., MacLennan, J. D., and Howes, E. L. (1953) Isolation and Characterization of Proteinase and Collagenase from Cl. histolyticum, J. Clin. Invest., 32, 1323-1329
– reference: Thompson, E. H., Wolf, I. D., and Allen, C. E. (1973) Ginger Rhizome : A New Source of Proteolytic Enzyme, J. Food Sci., 38,652-655
– reference: Wilson, E. L., and Burns, D. J. W. (1983) Kiwifruit Juice Processing Using Heat Treatment Techniques and Ultrafiltration, J. Food Sci., 48, 1101-1105
– reference: Yamaguchi, T., Yamashita, Y., Takeda, I., and Kiso, H. (1982) Proteolytic Enzymes in Green Asparagus, Kiwi Fruit and Miut : Occurrence and Partial Characterization, Agric. Biol. Chem., 46, 1983-1986
– reference: 中西洋子, 成瀬明子, 梶田武俊 (1994) 高度に精製したキウイフルーツプロテアーゼ (アクチニジン) の自己消化に及ぼす温度の影響, 家政誌, 45,609-614
– reference: Moore, S., and Stein, W. H. (1957) A Modified Ninhydrin Reagent for the Photometric Determination of AminoAcid and Related Compounds, J. Biol. Chem., 211,907-913
– reference: Arcus, A. C. (1959) Proteolytic Enzyme of Actinidia chinensis, Biochim. Biophys. Acta, 33,242-244
– reference: Shimizu, Y., Nakamura, T., Niki, T., Hemmi, H., and Sugamura, K. (1989) Purification and Characterization of a T Lymphocyte-Derived Differentiation Inducing Factor for Human Promyelocytic Cell Line (HL-60) and Its Relationship to Lymphotoxin, Microbiol. Immunol., 33, 489-501
– reference: Kimmel, J. R., and Smith, E. L. (1954) Crystalline Papain I. Preparation, Specificity, and Activation, J. Biol. Chem., 207,515-531
– reference: McDowall, M. A. (1970) Anionic Proteinase from Actinidia chinensis, Eur. J. Biochem., 14,214-221
– reference: 松本睦子, 河村フジ子 (1988) ゼラチンゲルにおよぼすキウイフルーツの影響について, 東京家政大研究紀要, 28,123-127
– reference: 市田隆文, 八木一芳, 山田慎二, 荒川謙二, 井上恭一, 宮際 幹, 小玉修嗣, 岩田和士, 早川太郎 (1988) 肝疾患におけるコラゲナーゼインヒビターの臨床的意義, 肝臓, 29, 410
– reference: 曽田 功, 金子美穂, 佐藤隆英, 中川弘毅, 小倉長雄 (1987) キウイフルーツプロテアーゼの利用について, 日食工誌, 34, 36-41
– reference: Carne, A., and Moore, C. H. (1978) The, Amino Acid Sequence of the Tryptic Peptides from Actinidin, a Proteolytic Enzyme from the Fruit of Actinidia chinensis, Biochem. J., 173, 73-83
– reference: 橋本昭彦, 竹内洋子, 河原有三, 安本教傳 (1991) ショウガ根茎のプロテイナーゼおよびコラゲナーゼ活性, 栄食誌, 44,127-132
– reference: 津田泰夫, 赤池紀扶 (1982) 単一心筋研究の現況, 生体の科学, 33,126-134
– reference: Gallop, P. M., Seifter, S., and Meilman, E. (1957) Studies on Collagen I. The Purification, Assay, and Mode of Activation of Bacterial Collagenase, J. Biol. Chem, 227, 891-906
– reference: 谷口 洋, 江尻一成, 石原建造, 馬場茂明 (1982) 孤. 単離細胞を用いた医化学研究の諸方法. 3. 膵島の培養とその機能, 代謝, 19,299-311
– reference: Boland, M. J., and Hardman, M. J. (1972) Kinetic Studies on the Thiol Protease from Actinidia chinensis, FEBS Lett., 27,282-284
– reference: 堤ちはる, 三好恵子, 谷 武子, 仙北谷至乃, 殿塚婦美子, 永弘悦子, 河野聡子, 吉中哲子 (1994) キウイフルーツの豚肉軟化効果について, 家政誌, 45,603-607
– reference: 和辻敏子, 宮本悌次郎 (1985) キウイフルーツの牛肉軟化効果について, 調理科学, 18,128-132
– reference: 橋永文男, 福留哲朗, 伊藤三郎 (1986) キウイフルーツ果実の追熟中のプロテアーゼ活性とその分布, 鹿児島大農学部学術報告, 36, 65-69
– reference: Liotta, L. A., Thorgeirsson, U. P., and Garbisa, S. (1982) Role of Collagenases in Tumor Cell Invasion, Cancer Metast. Rev., 1,277-288
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