Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用

R363.2; [目的]探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制.[方法]RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平.荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性.过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ...

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Published inZhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 43; no. 6; pp. 995 - 1004
Main Authors 丰嘉欣, 郭继深, 梁俣, 姜佳雪, 李晖, 徐金东, 方咸宏, 单志新
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006 01.11.2022
广东省人民医院广东省临床药理学重点实验室,广东广州510080%南方医科大学第二临床医学院,广东广州510280%广东省心血管病研究所心内科,广东广州510080%华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006%广东省人民医院检验科,广东广州510080%广东省人民医院麻醉科,广东广州510080%广东省人民医院广东省临床药理学重点实验室,广东广州510080
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
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ISSN1672-3554
DOI10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0

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Abstract R363.2; [目的]探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制.[方法]RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平.荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性.过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响.利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响.质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列.利用小干扰RNA(siRNA)抑制HERC4-193表达,检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响.[结果]在心衰病人心肌中,相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4,环形RNA circ_0018478表达显著增加.FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中.放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性.过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达.质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白.过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型,而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用(P<0.05).[结论]Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用.
AbstractList 目的探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。方法RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平。荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性。过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响。利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响。质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列。利用小干扰RNA(siRNA)抑制HERC4-193表达,检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响。结果在心衰病人心肌中,相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4,环形RNA circ_0018478表达显著增加。FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中。放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性。过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达。质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白。过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型,而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用(P<0.05)。结论Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。
R363.2; [目的]探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制.[方法]RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平.荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性.过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响.利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响.质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列.利用小干扰RNA(siRNA)抑制HERC4-193表达,检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响.[结果]在心衰病人心肌中,相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4,环形RNA circ_0018478表达显著增加.FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中.放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性.过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达.质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白.过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型,而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用(P<0.05).[结论]Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用.
Author 徐金东
李晖
郭继深
姜佳雪
方咸宏
丰嘉欣
单志新
梁俣
AuthorAffiliation 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006;广东省人民医院广东省临床药理学重点实验室,广东广州510080%南方医科大学第二临床医学院,广东广州510280%广东省心血管病研究所心内科,广东广州510080%华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006%广东省人民医院检验科,广东广州510080%广东省人民医院麻醉科,广东广州510080%广东省人民医院广东省临床药理学重点实验室,广东广州510080
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XU Jin-dong
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Issue 6
Keywords 心肌纤维化
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翻译
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Publisher 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006
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