褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立
应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法。结果表明：当拟环纹豹蛛稀释512倍（含拟环纹豹蛛0.04mg/mL）时，直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5％以上。而当捕食者稀释100倍时，对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5％。在加入100倍豹蛛稀释液时，3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90ng/mL（1／17509头褐飞虱雌成虫），直接和间接ELISA分别为：67.59ng/mL（1／4378头）和135.18ng/mL（1/2189头）。建立了4B8稀释100倍（28.13μg/mL)，捕食者匀浆液定...
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| Published in | Zhejiang daxue xue bao. Journal of Zhejiang University. Agriculture and life sciences. Nong ye yu sheng ming ke xue ban Vol. 28; no. 6; pp. 629 - 634 |
|---|---|
| Main Author | |
| Format | Journal Article |
| Language | Chinese |
| Published |
浙江大学,应用昆虫学研究所,浙江,杭州,310029%浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029
2002
|
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1008-9209 |
| DOI | 10.3321/j.issn:1008-9209.2002.06.010 |
Cover
| Abstract | 应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法。结果表明：当拟环纹豹蛛稀释512倍（含拟环纹豹蛛0.04mg/mL）时，直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5％以上。而当捕食者稀释100倍时，对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5％。在加入100倍豹蛛稀释液时，3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90ng/mL（1／17509头褐飞虱雌成虫），直接和间接ELISA分别为：67.59ng/mL（1／4378头）和135.18ng/mL（1/2189头）。建立了4B8稀释100倍（28.13μg/mL)，捕食者匀浆液定容至1mL／头后再稀释100倍，HRP－4B8稀释4000倍（1.04μg/mL）的夹心ELISA用于检测捕食者肠道中的褐飞虱抗原。在此系统下，检测灵敏度为每头拟环纹豹蛛含1.69μg猎物蛋白（1／175头褐飞虱雌成虫），非目标抗原的影响小于5％。 |
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| AbstractList | S433.3%Q939.91; 应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法.结果表明:当拟环纹豹蛛稀释512倍(含拟环纹豹蛛0.04 mg/mL)时,直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5%以上.而当捕食者稀释100倍时,对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5%.在加入100倍豹蛛稀释液时,3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90 ng/mL(1/17509头褐飞虱雌成虫),直接和间接ELISA分别为:67.59 ng/mL (1/4378头)和135.18 ng/mL (1/2189头).建立了4B8稀释1000倍(28.13 μg/mL),捕食者匀浆液定容至1 mL/头后再稀释100倍,HRP-4B8稀释4000倍(1.04 μg/mL)的夹心ELISA用于检测捕食者肠道中的褐飞虱抗原.在此系统下,检测灵敏度为每头拟环纹豹蛛含1.69 μg猎物蛋白(1/175头褐飞虱雌成虫),非目标抗原的影响小于5%. 应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法。结果表明：当拟环纹豹蛛稀释512倍（含拟环纹豹蛛0.04mg/mL）时，直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5％以上。而当捕食者稀释100倍时，对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5％。在加入100倍豹蛛稀释液时，3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90ng/mL（1／17509头褐飞虱雌成虫），直接和间接ELISA分别为：67.59ng/mL（1／4378头）和135.18ng/mL（1/2189头）。建立了4B8稀释100倍（28.13μg/mL)，捕食者匀浆液定容至1mL／头后再稀释100倍，HRP－4B8稀释4000倍（1.04μg/mL）的夹心ELISA用于检测捕食者肠道中的褐飞虱抗原。在此系统下，检测灵敏度为每头拟环纹豹蛛含1.69μg猎物蛋白（1／175头褐飞虱雌成虫），非目标抗原的影响小于5％。 |
| Author | 赵伟春 陈正贤 等 |
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| SourceID | wanfang chongqing |
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| SubjectTerms | ELISA条件 单克隆抗体 吸附试验 抗原检测 灵敏度 褐飞虱 酶联免疫 非目标抗原 |
| Title | 褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立 |
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