IL-17A对肝癌细胞系干性的影响

目的探讨IL-17A对人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H及MHCC97L干性的影响，以期分析IL-17A与肝癌发展之间的关系。方法选用人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H及MHCC97L通过体外3D成球实验分析IL-17A对其成球能力的影响，分为只含有普通培养液的对照组和加50ng／mlIL-17A的实验组。采用实时无标记动态细胞分析技术检测IL-17A对成球能力增强的肝癌细胞增殖及迁移的影响；采用实时定量PCR检测分析IL-17A对成球能力增强的肝癌细胞所表达的IL-17A受体IL-17RA、IL-17RC以及干性相关基因SOX2、NANOG、OCT4、BMII的mRNA表达的影响；通...

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Published in临床肝胆病杂志 Vol. 33; no. 6; pp. 1131 - 1136
Main Author 李可心 臧梦雅 王冬梅 贺欢 王宇婷 曲春枫
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室,北京,100021%国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室,北京100021 2017
国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室,北京100021
Subjects
实验性
白细胞介素17
细胞系
肝肿瘤
肿瘤
肿瘤干细胞
肝肿瘤,实验性
interleukin-17
neoplastic stem cells
白细胞介素17
细胞系,肿瘤
cell line,tumor
liver neoplasms,experimental
肿瘤干细胞
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ISSN1001-5256
DOI10.3969/j.issn.1001-5256.2017.06.023

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Summary:目的探讨IL-17A对人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H及MHCC97L干性的影响，以期分析IL-17A与肝癌发展之间的关系。方法选用人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H及MHCC97L通过体外3D成球实验分析IL-17A对其成球能力的影响，分为只含有普通培养液的对照组和加50ng／mlIL-17A的实验组。采用实时无标记动态细胞分析技术检测IL-17A对成球能力增强的肝癌细胞增殖及迁移的影响；采用实时定量PCR检测分析IL-17A对成球能力增强的肝癌细胞所表达的IL-17A受体IL-17RA、IL-17RC以及干性相关基因SOX2、NANOG、OCT4、BMII的mRNA表达的影响；通过WesternBlot检测上皮-间质转换（EMT）相关蛋白E-钙黏蛋白（E—cadherin）、N-钙黏蛋白（N—cadherin）、波形蛋白（vimentin）的表达。计量资料组间比较采用t检验。结果在存在50ng／mlIL-17A及接种细胞数均为500个的条件下，Hep3B肝癌细胞的成球数目显著增加[由（113．0±10．3）个增加至（180．0±7．2）个，t=5．533，P〈0．001]，MHCC97H（t：1．087，P=0．325）及MHCC97L（t=0．279，P=0．785）的成球数目无明显变化。对于成球数目增加的Hep3B细胞，进一步分析发现IL-17A促进了其增殖和迁移。并且，加入50ng／mlIL-17A后，IL-17A受体IL-17RA及IL-17RCmRNA的表达随着作用时间的增加而升高；加入50ng／ml IL-17A作用后，Hep3B细胞的干性相关基因SOX2（t=4．749，P：0．042）、NANOG（t=19．600，P=0．003）、OCT4（t：37．310，P〈0．001）和BM11（t=16．810，P=0．004）的mRNA表达均显著上调；通过Westernblot检测发现EMT相关上皮源性标志物E—Cadherin表达无明显的降低趋势，vimentin表达未出现稳定升高。间质性标志物N—Cadherin在50rig／m1IL-17A作用48h时后其mRNA表达增加（t=17．620，P=0．036）。结论IL-17A在一定程度上增强了Hep3B肝癌细胞的干性。
Bibliography:liver neoplasms, experimental; cell line, tumor; interleukin- 17; neoplastic stem cells
LI Kexin, ZANG Mengya, WANG Dongmei, et al. （Department of Immunology, National Cancer Center~Cancer Hospital, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100021, China）
Objective To investigate the effect of interleukin - 17A （ IL - 17A） on stemness of human hepatoma cell lines Hep 3B, MH- CC97H, and MHCC97L and the association between IL - 17A and the progression of liver cancer. Methods Human hepatoma cell lines Hep 3B, MHCC97H, and MHCC97L were selected, and in vitro 3D sphere formation assay was used to analyze the effect of IL - 17A on sphere formation ability. The control group with common culture solution and the experimental group with 50 ng/ml IL - 17A were estab- lished. Real - time cellular analysis was used to determine the effect of IL - 17A on the proliferation and migration of hepatoma cells with en- hanced sphere formation ability; quantitative real - time PCR was used to measu
ISSN:1001-5256
DOI:10.3969/j.issn.1001-5256.2017.06.023