流动注射-串联质谱法快速筛选植物提取物对药物代谢酶的抑制潜性

基于流动注射-串联质谱(FI-MS/MS)技术,综合运用微孔板低温孵育、低温样品相分离、"六合一"进样和多探针同时定量分析,建立了体外快速筛选复杂中草药组分抑制细胞色素P450同工酶活性的新方法.FI-MS/MS新技术不依赖色谱分离,也无需复杂的仪器设备和样品前处理,分析通量大幅提高.采用基质匹配标样和内标法定量,方法的准确度、精密度、灵敏度和线性范围均满足孵育体系中代谢物分析的需要.优化条件下测得各酶动力学参数和对照抑制剂的半抑制率(IC50)均与参考值一致;仅用两抑制剂浓度点即可获得满意的IC50近似值,两点IC50的测试重现性良好.结合两点IC50程序,FI-MS/M...

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Published inFēnxī huàxué Vol. 38; no. 12; pp. 1692 - 1697
Main Author 郭宾 段俊敏 王美玲 王晓莹 陈波 Jun-Min Mei-Ling Xiao-Ying
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 湖南师范大学化学化工学院制药工程系,化学生物学及中药分析教育部重点实验室,长沙,410081 2010
Subjects
Based
Human
IC50
Major
Mass
P450s
P450同工酶
Spectrometry
串联质谱法
内标法定量
同时定量分析
多组分体系
快速筛选
抑制剂
方法
样品前处理
植物提取物
流动注射
综合运用
药物代谢酶
酶动力学参数
质谱
筛选
抑制
中药
流动注射
细胞色素氧化酶
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ISSN0253-3820
DOI10.3724/SP.J.1096.2010.01692

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Abstract 基于流动注射-串联质谱(FI-MS/MS)技术,综合运用微孔板低温孵育、低温样品相分离、"六合一"进样和多探针同时定量分析,建立了体外快速筛选复杂中草药组分抑制细胞色素P450同工酶活性的新方法.FI-MS/MS新技术不依赖色谱分离,也无需复杂的仪器设备和样品前处理,分析通量大幅提高.采用基质匹配标样和内标法定量,方法的准确度、精密度、灵敏度和线性范围均满足孵育体系中代谢物分析的需要.优化条件下测得各酶动力学参数和对照抑制剂的半抑制率(IC50)均与参考值一致;仅用两抑制剂浓度点即可获得满意的IC50近似值,两点IC50的测试重现性良好.结合两点IC50程序,FI-MS/MS方法成功应用于中药粗提液对人体主要P450酶抑制效应的快速筛选与分类,为多组分体系复杂药代相互作用的研究和评估提供了一种有效手段.
AbstractList O6; 基于流动注射-串联质谱(FI-MS/MS)技术,综合运用微孔板低温孵育、低温样品相分离、"六合一"进样和多探针同时定量分析,建立了体外快速筛选复杂中草药组分抑制细胞色素P450同工酶活性的新方法.FI-MS/MS新技术不依赖色谱分离,也无需复杂的仪器设备和样品前处理,分析通量大幅提高.采用基质匹配标样和内标法定量,方法的准确度、精密度、灵敏度和线性范围均满足孵育体系中代谢物分析的需要.优化条件下测得各酶动力学参数和对照抑制剂的半抑制率(IC50)均与参考值一致;仅用两抑制剂浓度点即可获得满意的IC50近似值,两点IC50的测试重现性良好.结合两点IC50程序,FI-MS/MS方法成功应用于中药粗提液对人体主要P450酶抑制效应的快速筛选与分类,为多组分体系复杂药代相互作用的研究和评估提供了一种有效手段.
基于流动注射-串联质谱(FI-MS/MS)技术,综合运用微孔板低温孵育、低温样品相分离、"六合一"进样和多探针同时定量分析,建立了体外快速筛选复杂中草药组分抑制细胞色素P450同工酶活性的新方法.FI-MS/MS新技术不依赖色谱分离,也无需复杂的仪器设备和样品前处理,分析通量大幅提高.采用基质匹配标样和内标法定量,方法的准确度、精密度、灵敏度和线性范围均满足孵育体系中代谢物分析的需要.优化条件下测得各酶动力学参数和对照抑制剂的半抑制率(IC50)均与参考值一致;仅用两抑制剂浓度点即可获得满意的IC50近似值,两点IC50的测试重现性良好.结合两点IC50程序,FI-MS/MS方法成功应用于中药粗提液对人体主要P450酶抑制效应的快速筛选与分类,为多组分体系复杂药代相互作用的研究和评估提供了一种有效手段.
Author 郭宾 段俊敏 王美玲 王晓莹 陈波 Jun-Min Mei-Ling Xiao-Ying
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