基于末端脱氧核苷酸转移酶扩增DNA-铜纳米簇荧光传感检测L-组氨酸

利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）扩增形成聚胸腺嘧啶（T）DNA模板,制备了聚T铜纳米簇（TS-CuNCs）,构建了一种用于L-组氨酸（L-His）检测的荧光传感分析新方法。TdT酶在d TTP存在下合成聚T单链DNA核苷酸序列。由于胸腺嘧啶和Cu~（2＋）之间的亲合力,聚T单链DNA作为合成铜纳米簇（CuNCs）的模板,加入还原剂后形成CuNCs,荧光强度增强。在L-His存在下,L-组氨酸的咪唑基与Cu~（2＋）螯合形成L-His-Cu~（2＋）配合物,因而进入聚胸腺嘧啶序列中的Cu~（2＋）量减少,使得合成的CuNCs数量减少,导致荧光信号减弱。实验结果表明,体系荧光响应信号与L-His...

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Published in分析化学 Vol. 45; no. 10; pp. 1517 - 1522
Main Author 肖慧 何婧琳 肖昊 杨婵 冯泽猛 印遇龙 曹忠
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 长沙理工大学化学与生物工程学院,电力与交通材料保护湖南省重点实验室,微纳生物传感与食品安全检测协同创新中心,长沙410114%中国科学院亚热带农业生态研究所,长沙,410125 2017
Subjects
L-组氨酸
末端脱氧核苷酸转移酶
聚胸腺嘧啶
荧光分析
铜纳米簇
Fluorescence analysis
末端脱氧核苷酸转移酶
荧光分析
Poly-thymine
Copper nanoclusters
L-Histidine
铜纳米簇
Terminal deoxynucleotidyl transferase
聚胸腺嘧啶
L-组氨酸
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ISSN0253-3820
DOI10.11895/j.issn.0253-3820.170336

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Summary:利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）扩增形成聚胸腺嘧啶（T）DNA模板,制备了聚T铜纳米簇（TS-CuNCs）,构建了一种用于L-组氨酸（L-His）检测的荧光传感分析新方法。TdT酶在d TTP存在下合成聚T单链DNA核苷酸序列。由于胸腺嘧啶和Cu~（2＋）之间的亲合力,聚T单链DNA作为合成铜纳米簇（CuNCs）的模板,加入还原剂后形成CuNCs,荧光强度增强。在L-His存在下,L-组氨酸的咪唑基与Cu~（2＋）螯合形成L-His-Cu~（2＋）配合物,因而进入聚胸腺嘧啶序列中的Cu~（2＋）量减少,使得合成的CuNCs数量减少,导致荧光信号减弱。实验结果表明,体系荧光响应信号与L-His浓度的对数值在5.0×10~（-9）~5.0×10~（-4）mol/L范围内呈线性关系,检出限达到3.4×10~（-9）mol/L。本方法用于实际尿液样品中L-组氨酸检测的回收率为97.4%~104.6%,在生物医学及临床诊断中具有潜在应用价值。
Bibliography:XIAO Hui1 , HE Jing-Lin1, XIAO Hao2, YANG Chan1 , FENG Ze-Meng2, YIN Yu-Long2, CAO Zhong1 （ 1 Collaborative Innovation Center of Micro/Nano Bio-sensing and Food Safety Inspection,Hunan Provincial Key Laboratory of Materials Protection for Electric Power and Transportation,School of Chemistry and Biological Engineering, Changsha University of Science and Technology, Changsha 410114, China;2 Institute of Subtropical Agriculture, Chinese Academy of Sciences, Changsha 410125, China）
A terminal deoxynucleotidyl transferase（TdT） amplification based DNA-copper nanoclusters（CuNCs） sensor was developed for detection of L-histidine（L-His）.Single strand DNA containing polythymine（T） sequences were synthesized by TdT in the presence of d TTP.In blank control,poly-T sequences worked as templates of CuNCs due to the affinity between thymine and copper ions（Ⅱ）.Fluorescence intensity was enhanced when CuNCs formed with reducing agents.In the presence of L-His,the imidazolyl group of L-His worked as a chelating agent that form
ISSN:0253-3820
DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.170336