酪氨酸酶基因在HepG2细胞中表达的MR评价及其方法

R445.2; 背景与目的:基因治疗是生命科学研究的前沿领域,但目前其主要技术手段--基因转染及表达尚缺乏理想的无创性评价方法,影像学与分子生物学技术结合有可能解决这一问题,但这方面研究才刚刚开始.本研究利用酪氨酸酶基因作为报告基因,在体外细胞中进行实验,以探索MR评价体外细胞基因表达的方法.方法:以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HepG2细胞,利用其合成大量黑色素而在T1WIMR影像上呈高信号的特性来反映基因表达的情况,同时应用Fontana染色法检测黑色素和RT-PCR检测cDNA片段的方法来进一步验证.结果:(1)Fontana染色法可检测到HepG2细...

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Published in癌症 Vol. 22; no. 2; pp. 156 - 159
Main Authors 元建鹏, 梁碧玲, 谢榜昆, 钟镜联
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中山大学孙逸仙纪念医院放射科,广东,广州,510120 2003
Subjects
基因表达
评价
HepG2细胞
磁共振成像
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ISSN1000-467X
DOI10.3321/j.issn:1000-467X.2003.02.010

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Abstract R445.2; 背景与目的:基因治疗是生命科学研究的前沿领域,但目前其主要技术手段--基因转染及表达尚缺乏理想的无创性评价方法,影像学与分子生物学技术结合有可能解决这一问题,但这方面研究才刚刚开始.本研究利用酪氨酸酶基因作为报告基因,在体外细胞中进行实验,以探索MR评价体外细胞基因表达的方法.方法:以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HepG2细胞,利用其合成大量黑色素而在T1WIMR影像上呈高信号的特性来反映基因表达的情况,同时应用Fontana染色法检测黑色素和RT-PCR检测cDNA片段的方法来进一步验证.结果:(1)Fontana染色法可检测到HepG2细胞内的黑色素颗粒.(2)采用RT-PCR方法可检测到转染的HepG2细胞中含酪氨酸酶基因的cDNA片段.(3)pcDNA3tyr质粒转染进入HepG2细胞并在其中表达生成黑色素,其数量能够被MR检测到,这种黑色素与在正常细胞中生成的黑色素一样在T1WIMR影像上呈高信号,且MR信号强度与转染质粒量成正相关.结论:MR能够检测到体外细胞内合成的黑色素,说明影像学与分子生物学技术结合可能成为一种评价体外细胞基因表达的方法.
AbstractList R445.2; 背景与目的:基因治疗是生命科学研究的前沿领域,但目前其主要技术手段--基因转染及表达尚缺乏理想的无创性评价方法,影像学与分子生物学技术结合有可能解决这一问题,但这方面研究才刚刚开始.本研究利用酪氨酸酶基因作为报告基因,在体外细胞中进行实验,以探索MR评价体外细胞基因表达的方法.方法:以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HepG2细胞,利用其合成大量黑色素而在T1WIMR影像上呈高信号的特性来反映基因表达的情况,同时应用Fontana染色法检测黑色素和RT-PCR检测cDNA片段的方法来进一步验证.结果:(1)Fontana染色法可检测到HepG2细胞内的黑色素颗粒.(2)采用RT-PCR方法可检测到转染的HepG2细胞中含酪氨酸酶基因的cDNA片段.(3)pcDNA3tyr质粒转染进入HepG2细胞并在其中表达生成黑色素,其数量能够被MR检测到,这种黑色素与在正常细胞中生成的黑色素一样在T1WIMR影像上呈高信号,且MR信号强度与转染质粒量成正相关.结论:MR能够检测到体外细胞内合成的黑色素,说明影像学与分子生物学技术结合可能成为一种评价体外细胞基因表达的方法.
Author 梁碧玲
元建鹏
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